周小飞自五岁起便投身于武术训练，师从王世泉与韩燕武两位武术名家，系统学习了八极拳、八卦掌等多种拳法与器械技艺。他在长期的习武生涯中，广泛涉猎并掌握了剑术、枪术、拳法、敦煌武术、跆拳道以及成套的招式演练，展现出全面的武术才能。凭借精湛的技艺与卓越的表现，周小飞荣获了国家“武英级”运动员这一武术领域的最高称号。在其职业生涯中，他曾先后担任江苏省武术队以及中国人民解放军八一武术队的队长职务，带领队伍在训练与比赛中取得了显著成绩。周小飞
周小飞的演艺生涯始于2002年，当时她首次在电视剧《群英会》中亮相，饰演了女二号小梅一角，这是一个无法言语的角色，此次演出标志着她正式开启了在演艺界的道路。到了2006年，她作为领衔主演参与了动作功夫剧《功夫小英雄》的拍摄，在剧中她化身为跆拳道教练兼敦煌派传人秋菊，展现了其动作戏的潜力。2009年，她参演的风情功夫舞台剧《什刹海》在北京成功举行了首场演出，进一步拓宽了她的表演形式。2010年，她在皮尔瑞·雷金纳德·迪奥执导的奇幻冒险电影《巫师镇》中扮演了一位中国侠客；同年，她还在由成龙和贾登·史密斯联袂主演的动作电影《功夫梦》中饰演了蛇女这一角色。 2011年11月18日，一部历史题材电影《杨门女将之军令如山》上映，周小飞在片中饰演了杨家烧火丫鬟、佘太君义女杨排风。2012年，她参演了由王家卫执导，梁朝伟与章子怡主演的动作电影《一代宗师》，在片中她诠释了金楼三姐这一人物。2014年，在海涛执导的古装悬疑系列电影《侠僧探案传奇》的第五部作品《洛阳花会》中，她饰演了凌燕。2015年，在林峯和迪丽热巴领衔主演的古装传奇剧[###《一代宗师》0###]中，她出演了武艺高超却对爱人盲目崇拜的角色单青。 2017年4月18日，由她主演的动作电影[###《一代宗师》1###]举行了名为“请留步”的概念发布会。2021年9月28日，在播出的电影[###《一代宗师》2###]里，她饰演了蝎子一角。同年，她还参演了电视剧[###《一代宗师》3###]以及一部武侠励志剧[###《一代宗师》4###]。2022年，她参演的电影[###《一代宗师》5###]正式播出。 2023年1月24日，周小飞加盟了中国网络视听年度盛典。同年6月，她参演了动作短片[###《一代宗师》6###]；7月23日，她参演的电视剧[###《一代宗师》7###]播出；11月7日，另一部她参演的电视剧[###《一代宗师》8###]也与观众见面。进入2024年，她的作品持续推出：2月6日，参演的电视剧[###《一代宗师》9###]播出；3月23日，出演的民国冒险悬疑剧《五行世家》播出；4月9日，参演的电影《落花洞新娘》上线播映；8月15日，参演的电影《重见天日》上映。 2025年1月，周小飞荣获2024国剧盛典国剧匠人精神奖，肯定了其专业贡献。同年7月，她的两部电视剧作品接连播出：27日播出的《凡人修仙传》和26日播出的《华山论剑》。12月31日，她参加的节目《梦圆东方・2026东方卫视跨年盛典》播出，并在其中表演了武术节目《男儿当自强》和《咏春》。2026年1月2日，她出演的电视剧《长屏惊梦》正式开机，预示着其演艺事业的新篇章。
身为武术演员的周小飞，凭借其多年训练所积累的扎实基本功与出众的身手，在电影《杨门女将》的拍摄过程中展现了极高的职业素养。在导演陈勋奇的严格指导下，她一丝不苟地完成了全套高难度动作。即便在拍摄期间不慎受伤，为了不耽误整个剧组的进度，她毅然选择了如同专业运动员在赛场上的处理方式——注射封闭针以缓解疼痛，并坚持继续投入拍摄工作。这种不畏艰辛、全心投入的敬业精神，深深赢得了导演及剧组同仁的认可与赞赏。在影片中，她深厚的武术功底表现得沉稳而扎实，结合其精湛的演技，将角色既刚毅硬朗又内蕴柔情的复杂气质刻画得淋漓尽致，完美融合了女性特有的柔美与角色所需的刚强。周小飞在《杨门女将》中的剧照亦捕捉到了她这份独特的银幕魅力。