一九六五年十二月二十日，于小慧在辽宁省丹东市出生。时光荏苒，至一九八三年，时年十八岁的于小慧顺利完成了高中学业，并凭借出色的表现考入沈阳话剧团，由此开启了她的艺术生涯。
一九九二年，这位演员的演艺事业迎来了一个活跃的时期。她首先在电影《新中国第一大案》中亮相，饰演了文仪一角；紧接着，她又担纲主演了电影《黑色闪电》，成功塑造了片中人物秦姣的形象。同年，由她主演的电视剧《血战奉阳城》也与观众见面，她在剧中诠释了白梅这一角色。进入一九九三年，她继续保持着高产的状态，主演了电影《血染桃花水》，扮演卓洛娃；随后又在电影《鸳梦惊魂》中担任主角，饰演了名为李莎的人物。一九九四年，她的作品序列进一步丰富，主演的电影《四大天王》播出，她在片中一人分饰两角，挑战了李睡莲和李梦莲两个人物；同年，她还与演员寇振海合作，共同出演了电视剧《张学良与郭松龄》；此外，她也参演了另一部电视剧《住别墅的女人》。一九九五年，她出演了电影《主仆历险记》，并在其中饰演罗娜。 一九九六年，她参与了由著名导演陈家林执导的古装历史剧《汉武帝》的拍摄，在剧中饰演了历史人物卫子夫；同年，她与张丰毅、尤勇、吴越等演员联袂主演了军事题材电视剧《和平年代》，在剧中她饰演了性格温柔娴静的慕容秋，凭借对这一角色的出色演绎，她荣获了中央电视台评选的十佳最受欢迎女演员奖。一九九七年，由她主演的电视剧《追逐墨尔本》播出。一九九八年，她主演的电视剧《乱世英豪》以及另一部主演的电视剧《汉刘邦》相继与观众见面。一九九九年，她与申军谊、李强合作，主演了由申亭亭执导的情感剧《有多少爱可以重来》，在剧中饰演了一位女强人角色吴丹妮；同年，她主演的电视剧《警网雄风》也如期播出。步入二零零零年，她主演的电视剧《警戒线》播出，她在剧中饰演了程梦丽这一角色。
二零零一年，演员李幼斌与白凡共同出演了犯罪题材剧集《情有千千劫》以及《法不容情》，展现了精彩的对手戏；同年，由其领衔主演的电视剧《潜罪》正式与观众见面，她在剧中成功塑造了童文慧这一角色，给观众留下了深刻印象；此外，她也在同年参与了电视剧《生命逃亡》的拍摄工作。进入二零零二年，她与寇振海、沈丹萍等演员合作，联袂主演了一部爱情剧《镜花水月》，在剧中她所饰演的林臻形象鲜明，情感细腻；同年，她在电视剧《烧锅屯钟声》中出演了杨天虹一角，该剧凭借其精良的制作和深刻的内涵，荣获了第二十四届中国电视剧飞天奖中短篇电视剧二等奖，取得了业界的广泛认可。二零零三年，她与演员程煜搭档，主演了一部情节紧凑的警匪剧《荣誉》，在剧中她挑战自我，饰演了一位心狠手辣的女老板沈玫，其表演极具张力；同年，她还与郭冬临、张凯丽共同主演了一部聚焦家庭关系的伦理剧《太太反击战》，演绎了平凡生活中的情感纠葛；此外，她亦参演了由导演王小康执导的爱情剧《爱我你怕了吗》，在剧中扮演了罗婉珍这一角色。二零零四年是其作品颇为丰富的一年，她联合王学圻、王茜华主演了一部商业题材剧集《情暖珠江》，饰演了角色舒默；同年，她再次与程煜合作，主演了以警察荣誉为核心主题的电视剧《步步紧逼》，致敬人民警察的奉献精神；同年，她还与许亚军、张恒共同主演了讲述医药研究及制药领域故事的电视剧《黑色郁金香》，展现了行业风貌；同年，她出演了由袁泉、吴若甫主演的都市悬疑剧《爱在边缘》，为剧集增添了亮点；此外，她还参与了电视剧《守候阳光》、《婆婆》以及《惩腐女人》的拍摄。二零零五年，她再次与郭冬临、张恒携手，主演了中国内地首部深入揭露传销黑幕的电视剧《上线》，具有重要的社会警示意义；同年，她出演了一部再现郑和下西洋宏伟历史画卷的历史剧《大航海》；同年，她与舒畅、赵琳共同主演了一部聚焦残疾人群体生活及情感世界的励志情感剧《花开有声》，在剧中她饰演的杨柳一角温暖而充满力量；同年，她在家庭伦理剧《莫让情两难》中饰演了齐蕊，展现了人物复杂的情感世界；同年，她还与符馨尹、梁静、张恒等演员合作，主演了以女性情感故事为核心的系列剧《都市女人.com》，描绘了现代女性的多样人生。
二零零六年，演员的演艺事业迎来了一个高产且收获颇丰的阶段。她与佟瑞欣、郑晓宁合作，共同主演了聚焦农村生活的电视剧《春暖南粤》，在剧中生动塑造了林英琴这一角色，并凭借其出色的演绎荣获了第二届新农村电视艺术节的最佳女主角奖项。同年，她还与廖京生、尤勇、何晴等演员联袂出演，参与了一部探讨婚姻与伦理话题的剧集《谁是我爸爸》。此外，她也出演了一部以家族恩怨与情感纠葛为核心情节的都市悬疑剧《朋友的朋友是朋友》。同样是在这一年，她主演的另一部电视剧《爱你那天正下雨》也与观众见面，她在剧中成功诠释了黎恩这一人物。 进入二零零七年，她的工作日程依然紧凑。她与程煜合作，主演了展现农家生活的系列剧《喜庆农家》。之后，她又与李立群、奚美娟等资深演员一同出演了一部聚焦家庭关系的情感剧《小家大事》。同年，她还在一部由孙斯阳、张蕊主演的少儿科幻题材剧集《快乐星球第三部》中友情出演，饰演了晓璐母亲这一角色。 二零零八年，她在作品《周恩来在重庆》中挑战了历史人物宋美龄的角色，其表演获得了关注。二零零九年，她继续活跃于荧屏，在宋春丽、李成儒主演的情感大戏《穷妈妈富妈妈》中饰演了莫莉。同年，她再次于唐国强执导的影视作品《解放》中出演宋美龄，进一步深化了对这一历史人物的塑造。此外，她参演的另一部电视剧《龙须沟》也在当年播出。 二零一零年，她的演艺事业持续发展。她出演了一部由高天、马恩然主演的年代剧《天下裘都》，展现了在不同历史背景下的表演能力。同年，她参演的两部电视剧《决战南京》与《解放大西南》相继播出，在这两部作品中，她均饰演了宋美龄，使其对这一经典形象的演绎更为观众所熟知。
二零一一年三月二十二日，由她参演的长篇电视剧《东方》于中央电视台综合频道黄金时段首播，她在剧中成功塑造了宋美龄这一历史人物形象；同年，她还加盟了由陈龙、石琳领衔主演的史诗风格传奇剧集《大矿山》，贡献了精彩的表演；此外，在马少骅、姚居德主演的革命历史题材电视剧《辛亥革命》中，她诠释了倪桂珍这一角色。二零一二年，她出演了一部聚焦家庭与时尚元素的偶像剧《亲情保卫战》；同年，在一部古装背景的悬疑侦探剧《大明按察使》里，她饰演了高夫人一角；也是在这一年，她参演了由舒畅、陈键锋、乔振宇共同主演的民国背景激战情感大戏《烽火佳人》。二零一三年，她主演的动作题材偶像剧《爱的保镖》正式播出，她在剧中扮演了许淑贞；同年，在徐帆、王建福主演的家庭伦理剧《更年期的战争》中，她饰演了徐爱华；同年，她还客串出演了一部现代时尚医疗职场剧《产科医生》，在剧中扮演伊丽莎娜医院院长苏红。二零一五年一月，在一部年代悬疑剧《心如铁》中，她饰演王其美的妻子，将一位历经丧子之痛后又意外失而复得的母亲复杂内心与情感变化演绎得淋漓尽致；八月十五日，她与夏绍航、黄妍菲等演员联袂主演的励志题材电影《本色兵》在全国公映。二零一六年二月，她参演的时尚青春励志剧《幸福巧克力》于深圳投入拍摄，她在剧中饰演外表强势、实则爱子心切的时尚母亲段陈韵梅；三月，由她与张洪睿、乔振宇领衔主演的民国题材电视剧《浴血重生》登陆深圳电视剧频道黄金档，她在剧中扮演了卢家大太太上官云；同年，她主演的另一部电视剧《三十年河东》也与观众见面，她在剧中饰演张悯梅。二零一七年，在唐国强、刘劲主演的大型革命历史剧《换了人间》中，她饰演了孙中山先生的夫人宋庆龄；同年，她还出演了由马鲁剑执导的现代新农村题材电视剧《梨花朵朵开》。二零一八年三月十四日，她主演的言情剧《幸福巧克力》以及一部古装剧《回到明朝当王爷》同日播出。二零二零年，她主演的电影《征迁》正式播映，她在片中饰演陈初欣一角。二零二三年四月二十日，她参演的网剧《悦香甜心》在无锡荡口古镇举行开机仪式；同年十一月十日，她参与的一档文脉探访团文化综艺节目《宗师列传·唐宋八大家》播出，在节目中她扮演了史氏这一角色。
于小慧在年仅十九岁时便步入了婚姻殿堂，二十岁那年她诞下了一名男婴。然而这段婚姻并未持续太久，由于丈夫发生不忠行为，她在孩子出生仅二十一天后便毅然带着幼子离开，结束了这段关系。离婚时她未分得任何财产或经济补偿，从此开始了独自抚育孩子的艰辛历程。在沈阳话剧院工作期间，她依靠微薄的工资维持生计，度过了数年拮据而劳碌的时光。直到剧院实行体制改革，她的演出机会逐渐增加，经济条件与生活状况才随之得到缓慢改善。此后，于小慧将事业重心转向商业领域，通过不懈努力最终取得了显著成就，不仅积累了可观财富，也具备了足够的经济实力支持孩子赴海外深造。但她的个人情感道路却再度遭遇波折，在与第二任伴侣相处过程中，她不仅遭受了情感背叛，还被对方骗取了不少钱财。尽管接连经历两次沉重的情感打击，于小慧内心深处却始终未曾放弃对美好爱情的向往与信任。如今她的第三段感情进展顺利，这段关系得到了儿子的衷心认可与支持。在她眼中，现任男友品行端正、心地善良且性格开朗，两人之间的联结建立在彼此真诚的情感基础之上，而非物质利益的考量。于小慧写真照
进入20世纪90年代后，于小慧开始了经商事业。
2006年，于小慧被深圳市政府作为文化人才引进。
二零零八年，于小慧女士应中国红十字基金会的诚挚邀请，正式担任该基金会的爱心天使，致力于公益慈善事业的推广与践行。就在同一年，她再次慷慨解囊，向中国扶贫协会捐赠了十万元人民币，这笔善款被特别设立为“于小慧孤儿救助专项基金”，旨在为失去父母关爱的孤儿群体提供长期、稳定的生活支持与成长援助。
于小慧是一位将表演艺术视为终身事业的演员，她始终秉持着活到老、演到老的信念。她的个人气质十分独特，具有很高的辨识度。在日常生活中，她为人平和谦逊，处事低调，丝毫不事张扬。从专业演员的角度来评价，她展现出极高的敬业精神。她的表演风格质朴自然，情感表达细腻入微，并且戏路宽广，能够驾驭多种不同类型的角色。于小慧非常勤奋刻苦，拥有旺盛的创作精力与热情。值得注意的是，在她已经从影十多年、各方面条件都已相当优渥的情况下，依然能保持着对表演艺术最初的那份热爱，以及认真严谨的创作态度，这份执着实属难得。在多年的艺术实践中，她的演技日益精进和成熟，因此在表演时能够全情投入，为角色倾尽所有，展现出豁得出去的职业魄力。她身上带有典型的东北女子的率真性情与直爽品格，不仅能在演艺事业上将角色塑造得深入人心，还能在商业领域将自己的生意经营得风生水起，这充分说明了她的聪慧与卓越的能力。为了维持良好的银幕形象与健康状态，她长期自律，坚持每天进行两小时的健身操锻炼。由此可见，她是一个在事业和生活上都对自己有着极高要求、非常严格的人。