尹真伊出生于韩国大田广域市，自幼便展现出对表演艺术的浓厚兴趣，很早就开始系统学习现代舞蹈，打下了坚实的舞蹈基础。童年时期，她已涉足演艺领域，在KBS1电视台的节目《电视的爱情装载》中作为童星参与活动，积累了宝贵的早期舞台经验。为了接受更广泛的教育，她在初中三年级时前往美国留学，完成了高中学业。高中毕业后，尹真伊选择回到韩国继续追求艺术梦想，进入世宗大学电影艺术系进行专业深造，进一步系统地学习电影与表演相关的理论知识及实践技能。
2012年5月，尹真伊凭借在SBS周末剧《绅士的品格》中饰演林回音一角正式出道，并因在该剧中的出色表现，与演员金民钟一同荣获了当年SBS演技大赏的最佳荧幕情侣奖。同年9月12日，她正式在新浪微博独家开通了个人账号，与中国粉丝建立了更为直接的交流渠道。也是在2012年，她的演艺事业获得了进一步认可，于第5届Korea Drama Festival韩国电视剧大奖中摘得了女子新人奖的荣誉。进入2013年，她的演艺活动持续活跃，于4月参演了KBS2的历史爱情剧《天命》，在剧中她扮演了盗贼的女儿素白，这一角色深情地单恋着由李东旭饰演的崔元，与宋智孝、任瑟雍等演员共同演绎了一段古代故事。到了12月，她又友情客串出演了一部青春题材剧集《请回答1994》，展现了其戏路的多样性。2014年4月，尹真伊与知名演员赵寅成、孔晓振合作，共同出演了SBS电视剧《没关系，是爱情啊》，她在剧中饰演了杂志作家李草叶，凭借细腻的表演获得了观众关注。紧接着在8月，她参演了一部爱情喜剧电影《恋爱的发现》，为观众带来了轻松愉快的观影体验。同年，她还参与了由著名导演陆剑青和梁乐民联合执导的反恐题材电影《赤道》，在片中饰演了一名韩国女子，进一步拓宽了大银幕表演经验。时隔数年，在2021年，尹真伊再度回归电视荧屏，参演了电视剧《绅士和小姐》，继续以其扎实的演技活跃于演艺界。
尹真伊的身材曲线玲珑有致，不仅拥有纤细修长的手臂，更兼具一双笔直优美的长腿，她凭借扎实的演技功底与灵动可爱的表情管理，被广大观众亲切地誉为“国民妹妹”。当年，尹真伊在竞争比例高达120比1的激烈试镜中成功脱颖而出，展现了其非凡的潜力与实力。随后，她在作品《绅士的品格》中饰演了角色林回音，这个人物性格讨喜、人见人爱，尹真伊凭借其甜美可人的外形与清新自然的表演风格，将这一角色演绎得深入人心，从而收获了极高的人气。许多观众都称赞她仿佛是《绅士的品格》中“如维他命般不可或缺的存在”，为整个故事注入了活力与光彩。毫无疑问，尹真伊以其显著的成就，成为了本年度韩国荧幕上最为成功且令人印象深刻的“灰姑娘”式演员。