在正式踏入演艺界之前，尹贤敏曾拥有职业棒球运动员的身份，他先后于2004年与2006年效力于韩国职业棒球联赛的韩华老鹰队以及斗山熊队。2009年，他通过参演喜剧作品《过山车1》正式开启演艺生涯，随后在多部电视剧中崭露头角；同年，他还出演了推理题材的历史剧《丁若镛》，进一步积累了表演经验。2010年，他加入了情景喜剧《越看越撒娇满分》的演出。2012年，他又参与了动作历史剧《夜叉》的拍摄。2013年，尹贤敏与郑京浩、南圭丽、李载允等演员共同主演了刑侦爱情剧《无情都市》，在剧中他饰演了重情重义、甘愿为朋友牺牲的角色金贤秀，这一形象给观众留下了深刻印象。2014年1月，他与金贤重、林秀香合作，主演了年代剧《感激时代》，饰演上海公共租界情报局局长青木一角，与剧中男主角正泰展开了精彩的对手戏。同年4月，他在tvN电视台的月火剧《魔女的恋爱》中饰演了男主角东夏的挚友龙秀哲。8月，他与郑有美、文晸赫、盛骏联手主演了浪漫喜剧《恋爱的发现》，饰演一位逐渐对浮华生活感到厌倦的整形外科医生都俊浩，并凭借在此剧中的表现获得了KBS演技大赏男子新人演技奖的提名。2015年4月，他与郑敬淏、金素妍联袂主演了浪漫爱情剧《陷入纯情》，饰演一心守护女主角纯情的法务组长李俊熙。同年9月，他首次担纲男主角，与白珍熙共同主演周末特别企划剧《我的女儿琴四月》，在剧中饰演建筑公司本部长江灿彬，为了保护女主角四月而不惜与自己的父亲产生冲突与对立。2017年，他与郑丽媛、全光烈一同出演了KBS2电视台的全新周一周二剧《魔女的法庭》。2020年2月7日，由他主演的韩剧《我的智能情人》通过Netflix平台全球推出，他在剧中挑战一人分饰两角；同年7月6日，他主演的奇幻爱情喜剧《他就是那家伙》于韩国KBS2电视台正式首播，他在剧中饰演了角色黄智宇。12月5日，他与刘仁娜、朱相昱合作的新剧《宝拉，黛宝拉》播出，他在剧中饰演李秀赫。2025年8月9日，他主演的KBS周末剧《华丽的日子》如期与观众见面。同年12月，他凭借在电视剧《我家的熊孩子》中的出色演绎，荣获了2025年SBS演艺大赏的最佳艺人奖项。
二零一五年四月九日，演员尹贤敏通过公开方式对外确认了自己的感情状况，正式承认与同为演员的全昭旻正处于一段热烈的恋爱关系之中。据了解，两人的相识可以追溯到二零一四年的一次朋友聚会，在之后的相处中逐渐加深了解并变得熟悉起来，直至二零一五年初，双方关系更进一步，正式从朋友发展为恋人，当时正处在彼此细心磨合与深入认识的阶段。然而，这段恋情并未能长久持续，尹贤敏与全昭旻在二零一五年年底最终选择了分手。由于两人均从事演员职业，各自忙碌于密集的电视剧拍摄工作，日常行程难以协调，彼此之间的距离在不知不觉中渐渐拉大，最终经过慎重考虑，决定回归到同事与朋友的关系。随后在二零一八年四月一日，尹贤敏的感情生活再次受到公众关注，他与演员白珍熙的恋情被媒体曝光并得到确认。这段关系持续了较长时间，直至二零二三年九月四日，据多家媒体报道，尹贤敏与白珍熙在相恋七年之后，同样因为各自事业行程繁忙、相处时间不断减少的原因，于近期和平结束了恋人关系。