自1977年起，这位演员便开启了其丰富的演艺生涯，首度亮相于张景隆导演执导的、根据同名小说改编的电影作品《渔岛怒潮》之中。两年后的1979年，他担纲主演了由黄健中导演执导的电影《小花》，并在其中成功塑造了“赵永生”这一角色。进入上世纪九十年代，1996年他主演了安战军导演的电影《红棉袄红棉裤》，饰演了名为“黑子”的人物；同年，他还主演了王彪导演的电影《截杀香阁寺》，出演了“赵德成”一角。1980年，他再次担任主演，在王君正导演的电影《苗苗》中饰演了“杨晓亮”。时光流转至2006年，他参演了宁浩导演的电影《疯狂的石头》，扮演了“何警官”。2007年，他主演了薛彦东导演的电影《浪子街》，饰演了“陈小龙”这一角色。 在电视剧领域，他的表现同样活跃。从1997年至1999年，他出演了陈燕民导演的电视剧《追逐墨尔本》，饰演“李爽”。1998年，他再次与陈燕民导演合作，在其执导的电视剧《空港塔台》中饰演了“庄小虎”。1999年，他参演了叶京导演的电视剧《梦开始的地方》，扮演了“小胖”。2000年，他主演了陈燕民导演的电视剧《黑血》，担纲男一号“仇众山”；同年，他还出演了陈燕民导演的《人虫儿》之《票虫儿》，饰演了“四德子”，并出演了电视剧《车虫儿》，再次饰演了“黑子”。演员王佳宁的名字也出现在后续的多个作品记录中，包括《民国往事》、《兄弟英雄》、《兄弟英雄》、《兄弟英雄》、《大刀》、《决战江桥》以及《兄弟英雄》等。 2005年，他主演了尹大为导演的电视剧《沧海利剑》，饰演“丁剑锋”。2008年，他主演了连奕名导演的电视剧《大刀》，扮演“郑德”，同时还主演了连奕名导演的另一部电视剧《大象》，饰演“阮流民”；同年，他还主演了陈燕民导演的电视剧《代号夜来香》，出演了“沈啸飞”一角。2009年，他继续与连奕名导演合作，主演了电视剧《中天悬剑》，饰演“黄文斌”；同年，他还领衔主演了王彪导演的电视剧《别无选择》，扮演了“梁队长”。2010年，他主演了周力导演的电视剧《宣言》，饰演“刘启盛”；同年，他还主演了连奕名导演的多部作品：在电视剧《兄弟英雄》中饰演“苏国强”，在电视剧《民国往事》中饰演“罗宗伟”，在电视剧《历史的进程》中饰演“祁春华”。此外，他还在姜伟导演的电视剧《借枪》中客串出演了“潘仰新（代号勋章）”，并在陈燕民导演的电视剧《经营婚姻》中客串饰演了“方柠”。 2011年，他主演了朱质冰导演的电视剧《国家记忆》，饰演“佟凤歧”；同年，他还主演了徐宗政导演的电视剧《战匪》，扮演了“马金彪”。此外，在2011年，他还主演了连奕名导演的电视剧《雪狼谷》，饰演“刘答应”，以及主演了连奕名导演的另一部电视剧《国际大营救》，饰演了“砍刀”。2013年，他主演了连奕名导演的电视剧《谁是真英雄》（又名《杀倭令》），饰演“宋云飞”。2014年，他主演了汪俊导演的电视剧《我的儿子是奇葩》，饰演“王总”。2015年，他主演了李印导演的战争剧《生死连》，出演了“中村正雄”一角。2016年，他出演了常猛导演的电视剧《红色通道》，饰演“程岐山”；同年，他还主演了李印执导的大型民国传奇剧《海上风云记》，扮演了“尤德彪”；同样是2016年，他还主演了李印导演的电视剧《决战江桥》，饰演了“万国宾”。2017年，他主演了吴斌导演的电视剧《远征，远征！》，再次饰演了“佟凤歧”。 进入二十一世纪二十年代，2021年7月17日，他特别出演的战争喜剧电影《另类民兵葛二蛋》在腾讯视频平台独家上映。2022年3月17日，他参演的都市情感剧《鼓楼外》播出，在剧中饰演“于江枫”；同年3月24日，他参演的抗战剧《烽烟尽处》也正式播出。2022年7月29日，他主演的电影《猛龙出击》登陆院线，与观众见面。
由著名导演连奕名执导的红色题材电视剧《兄弟英雄》自播出以来，便获得了广大观众的热烈反响与广泛好评。该剧不仅剧情设计扣人心弦、故事脉络跌宕起伏，更汇聚了聂远、霍思燕、王佳宁等一众实力派演员的倾情加盟与鼎力支持。在剧中，王佳宁成功塑造了一位刚正不阿、信念坚定的革命者形象，他以极具感染力的表演，在荧屏上刻画出一个可歌可泣、令人动容的硬汉角色，其精湛的演技也因此赢得了观众们的一致赞誉。 《兄弟英雄》这部剧集生动讲述了一群怀揣理想与抱负的年轻志士，为了挽救民族危亡、振兴国家命运，毅然选择踏上一条充满艰辛与挑战的革命道路。王佳宁所饰演的苏十八，不仅性格坚韧倔强、品行刚直，更对祖国与人民怀有深厚而炽热的情感。王佳宁本人曾表示，他非常喜爱这个角色，因为苏十八不仅为人正直，而且为了追寻和实现崇高理想，甚至不惜承受外界的误解与骂名，毅然舍弃个人情感，将内心深处的痛苦转化为前进的动力，始终朝着梦想坚定不移地迈进。在角色塑造过程中，王佳宁始终全身心沉浸于剧本之中，不断深入揣摩人物的内心世界，坚持从角色本身的视角出发去思考与感受，力求每一个细节都真实可信。 王佳宁这份对角色的专注与付出，最终换来了观众的高度认可，大家无不欣赏他所演绎的这位“钢铁英雄”。导演连奕名也对王佳宁的表现给予了充分褒奖，两人历经多次合作已建立起深厚的默契，连导对王佳宁的表演实力信心十足，王佳宁也俨然成为了连奕名导演作品中不可或缺的“御用演员”。连导评价道，王佳宁是一位极其敬业的演员，无论面对何种角色，他都能精准把握人物特质，表演层次分明，生动突出角色的个性魅力。事实上，王佳宁早已凭借在《大刀》、《野火春风斗古城》以及《铁齿铜牙纪晓岚》等多部作品中的出色演绎，给广大观众留下了深刻印象，其扎实的演技早已深入人心。 当前，由张嘉译、杜淳、王佳宁、李印等实力演员联袂主演的电视剧《雪狼谷》正在江苏卫视热播。与以往流行的、风格偏于阴柔的宫廷剧不同，这部作品充满了昂扬的热血与阳刚之气，自开播以来便取得了优异的收视成绩，获得了口碑与市场的双丰收。在剧中，实力演员王佳宁饰演“七匹狼”中的一员——刘答应。他通过细腻的演绎，时刻展现出角色身上那份独特的男性威武魅力，将铁血硬汉的形象诠释得淋漓尽致，再次以强烈的视觉冲击力席卷荧屏。此前，在《兄弟英雄》中，王佳宁饰演的苏国强就已让观众记忆犹新；此番在充满硬朗风格的《雪狼谷》里，他再度挑战同类硬汉角色，势必为观众带来全新的观剧惊喜。