早在小学阶段便已涉足配音领域，师从武莉等业界名家，并开始为电视广告进行配音工作。进入国中时期，她主持了警广广播电台的儿童节目《平平与安安》，其生动活泼的风格吸引了全台不同年龄层的广大听众，节目更于1981年荣获第十六届金钟奖最佳儿童节目的肯定。在长达近三十年的专业配音生涯中，她不仅熟练掌握了国语、台语及英语的多声带表达能力，还擅长通过变换音色来一人演绎多个角色。她那甜美而清晰的嗓音曾出现在无数的电视广告以及在台湾播映的众多港台电影之中，并经常担任电影女主角的国语配音工作，例如为张敏、袁咏仪等知名演员配译。此外，她也积极参与儿童故事录音带及3D立体童书的录制工作，以其富有感染力的声音陪伴了许多孩子的成长。
在众多影视作品所塑造的经典角色长廊中，一系列令人难忘的女性形象熠熠生辉。从聪慧果决的程灵素，到深情执着的白素贞，再到娇俏灵动的金牡丹，每一位都以其独特的魅力深入人心。宇文双的率真、杜青青的坚韧、踏雪的纯善、许仕林的温厚、阿舍的活泼、杨排风的飒爽、小莲的俏皮、张菁的明艳以及祝英台的痴情，共同构成了丰富多彩的人物画卷。此外，小鱼儿的机敏、许仙的儒雅、花月奴的柔美、何小春的爽朗，也都为故事增添了不可或缺的色彩。 这些角色通过不同演员的精彩演绎得以鲜活呈现。例如，在《掌声响起》中，柳文英一角由俞小凡诠释，赋予了人物温婉动人的气质。而《八月桂花香》中的玉格格，则由米雪出演，其表演精准捕捉了格格的尊贵与灵动。《戏说乾隆·江南除霸》里，张庭所饰演的小鱼儿，更是将角色的古灵精怪展现得淋漓尽致。在《戏说乾隆·西滇风云》中，刘红芳饰演的恕妃，则刻画出了宫廷女性内心的复杂与挣扎。 一些作品更呈现了多位演员共同塑造的群像。《新白娘子传奇》中，叶童一人分饰许仙与许仕林两角，展现了精湛的演技；徐慧宣饰演的采因、蔡雅玲饰演的香巧以及洪婉瑜饰演的陈玉娟，也都各有特色，丰富了剧情层次。《青青河边草》中，岳翎饰演的杜青青，其坚韧不屈的形象令人动容。《雪山飞狐》里，龚慈恩同时诠释程灵素与冰雪儿，细腻地区分了两个角色的不同性格。《红尘有爱》中，刘瑞琪塑造的柳凤英，则充满了传统女性的风韵与力量。 其他令人印象深刻的演绎还包括：《再世情缘》中况明洁饰演的珍格格，以及任盈盈这一经典角色。《少年张三丰》里，魏秋桦饰演的黄天碧，展现了人物成熟稳重的风范。《武林奇缘》中，陈法蓉饰演的尹玉玲与魏秋桦再度出演的雪子，形成了有趣的对比或联动。《游龙惊凤》中，潘迎紫饰演的张出尘，尽显其不凡的古典气质。《霹雳菩萨》里，杨丽菁饰演的阿舍，则突出了角色的英气与活力。《帝王之旅》中，侯炳莹诠释的凤凰，名字便寓意着角色的不凡与蜕变。 在《绝代双骄》中，李绮红饰演的张菁与萧蔷饰演的花月奴，两位演员各自展现了角色或娇蛮或温婉的特质。《青蛇外传》里，新加坡演员范文芳所饰演的白素贞，带来了别具一格的清新演绎。《天地传说之鱼美人》中，徐怀钰饰演的小莲活泼可爱，孙莉饰演的金牡丹端庄大方，相映成趣。《笑傲江湖》里，袁咏仪版本的任盈盈，则赋予了角色洒脱豪爽的现代感。《新梁山伯祝英台》中，梁小冰饰演的祝英台，完美诠释了为爱抗争的古典女子形象。《危险游戏》中，张瑜饰演的萧琼与岳小钗这一角色，共同展现了江湖女子的不同侧面。 此外，《绝世双骄》里天心饰演的宇文双与朱晏饰演的晓风，可能演绎了一段动人的情谊或故事。《天地传说之宝莲灯》中，沈傲君饰演的踏雪，其名如其人，气质清冷出众。《移山倒海樊梨花》里，孙翠凤饰演的樊梨花，生动塑造了一位巾帼英雄的形象。《如来神掌》中，朱茵饰演的屠雪华，想必也充满了角色的独特魅力。《草民县令》里，袁咏仪饰演的何小春，则可能展现了角色截然不同的另一面性格。《包公出巡》与《包公奇案》中，张晶所饰演的包纨，其形象通过不同作品的呈现或许更为丰满。 在《金剑雕翎》中，角色关系更为交织：罗海琼同时饰演岳小钗与岳云姑，孙晓燕饰演柳仙子，沈虹饰演燕儿，共同构建了一个丰富的女性角色网络。《杨门女将之女儿当自强》里，李绮红再度出演杨排风，展现了角色忠勇热血的一面。这些作品的影响力甚至超越了地域，例如《处女之路》中，日本演员和久井映见饰演的樱井和美，带来了跨国界的文化演绎。而在《叛逆战队》中，新加坡演员梁铮饰演的仇施丽，也为华语影视角色画廊增添了国际化的注脚。这些演员与角色的完美结合，使得每一个名字背后都承载了一段生动的故事和一份独特的情感记忆。
在众多影视作品中，演员们通过塑造各具特色的角色给观众留下了深刻印象。例如，袁洁莹曾在不同作品中饰演《开心鬼放暑假》戴卓仪、《开心乐园》Fennie、《开心鬼撞鬼》戴卓仪以及《笑侠楚留香》中原一点红等角色，展现出多样的表演风格。张敏同样以多变的形象著称，她诠释了《赌圣》绮梦、《五亿探长雷洛传》白月嫦、《五亿探长雷洛传Ⅱ父子情仇》白月嫦、《与龙共舞》陈月光、《逃学威龙》Miss Ho、《逃学威龙2》Miss Ho、《武状元苏乞儿》如霜、《女黑侠黄莺》黄莺/香奈儿、《新碧血剑》阿九、《逃学威龙3龙过鸡年》阿敏以及《九品芝麻官之白面包青天》戚秦氏等一系列人物，每个角色都独具魅力。周慧敏则带来了《三人新世界》毛慧敏、《YES一族》Yoko、《蓝江传之反飞组风云》梁小敏和《伦文叙老点柳先开》程情等令人难忘的演出。张曼玉所扮演的《射雕英雄传之东成西就》国师、《赤脚小子》白筱君、《追男仔》程小南和《神经刀与飞天猫》飞天猫，也充分体现了其精湛的演技。此外，林小楼饰演的《新桃太郎》桃太郎和《驱魔童》桃太郎，以及《逃学外传》钟慕莲，都为作品增添了丰富的色彩。李嘉欣塑造的《鹿鼎记Ⅱ：神龙教》阿珂和《方世玉续集》婷婷，关之琳出演的《龙神太子》之琳（静音），巩俐诠释的《唐伯虎点秋香》秋香，邵美琪扮演的《92黑玫瑰对黑玫瑰》蝴蝶，朱茵演绎的《风尘三侠》阿珠，邱淑贞饰演的《超级学校霸王》大雄妹，叶全真呈现的《新流星蝴蝶剑》何菁，苑琼丹担当的《赤裸羔羊2》女主角，杨林出演的《新阿里巴巴》黛安芬，吴倩莲诠释的《天若有情》Jojo，杨丽菁饰演的《飞女正传》女主角阿珂，袁咏仪塑造的《国产凌凌漆》李香琴和《横纹刀劈扭纹柴》裘小雪，杨采妮演绎的《逃学战警》白美红，梁咏琪呈现的《心动》沈小柔，钟丽缇出演的《恋爱的天空》Ady李香琴，以及天心扮演的《女汤》陶水莲，这些角色共同构成了丰富多彩的影视人物长廊，每位演员都凭借其独特的演绎为角色注入了鲜活的生命力。
在二零零九年《靠岸》中，小贩的妻子《哈尔的移动城堡》苏菲（青年时期）《百变狸猫》以及小清和佐助《幽灵公主》等角色相继登场。此外，阿时、桑与卡雅《小美人鱼3：回到当初》以及爱丽儿《冰雪奇缘》也出现在作品中。在台配版本里，艾莎与王后《美女与野兽》由同一人配音，而贝儿贝儿《幻想曲2000》和黛西《仙履奇缘3：时间魔法》也各有其声优演绎。崔西里雅《海底总动员》在台配版中同样有对应的配音呈现，珊瑚《超人总动员》一角亦不例外。KARI《亚特兰蒂斯：失落的帝国》与奥黛莉《变身国王2：高刚外传》以及玛姬和蒂娜《玩具总动员2》这些角色也包含在配音阵容之中。后续的名单还包括翠丝、花木兰、黛西、翠丝、爱丽儿以及袋鼠妈妈《仙履奇缘2：美梦成真》，崔西里雅《失落的帝国：神秘的水晶》和奥黛丽《米奇圣诞嘉年华》同样位列其中。黛西《米奇家族的万圣历险》与黛西《小鹿斑比2》的角色分别由不同配音演员负责，而班比的母亲《101忠狗续集：伦敦大冒险》和白佩蒂《小美人鱼之星梦宝盒》也有各自的配音安排。爱丽儿《小美人鱼之真假英雄》和爱丽儿《小熊维尼：小猪大行动》在不同作品或版本中由同一位或不同配音演员出演，袋鼠妈妈《小熊维尼：春天的百亩森林》、袋鼠妈妈《小熊维尼之圣诞大冒险》及袋鼠妈妈《南方公园》亦复如是。在美国版本中，温蒂（从第二季第九集开始接手）和大头《飞哥与小佛》由指定配音演员担任，史黛西《小美人鱼》同样属于美版阵容。美国版还包括了动画短片系列中的爱丽儿《小鬼大神探》。法语版本中则有楚蒂《特务欧宝》一角，美国版本中还包含了波波《Pucca》这个角色。韩国版本的配音阵容则包括Chief、Ssoso以及Doga等配音演员。
在2008年，她曾受邀作为嘉宾参与湖南卫视的一档节目录制《天天向上》。随后于2013年，她登上了江苏卫视春节联欢晚会的舞台，与当年共同出演经典剧集的几位主要演员赵雅芝、叶童以及陈美琪实现了难得的同台相聚。到了2018年3月23日，她再次现身于浙江卫视的一档节目之中《王牌对王牌第三季》，此次的阵容更为齐整，不仅与赵雅芝、叶童、陈美琪重逢，还汇聚了为该剧配音的陈美贞、张主蕙等幕后重要成员。至此，包括赵雅芝、叶童、陈美琪、陈美贞、张主蕙以及刘小芸在内的六位与该经典作品密切相关的女士，共同完成了一次意义非凡的集体亮相，引发了广大观众与影迷的热烈关注与美好回忆。
二零一六年，刘小芸投身于一项跨越海峡两岸的有声读物合作项目《呼归石》，在该项目中她负责为涂山女一角献声，并与来自重庆的青年插画师刘何跃携手合作，由刘何跃担任大禹的配音工作，共同完成了这一富有文化意义的作品。时间来到二零一八年四月，刘小芸受邀出席了第八届北京国际电影节期间举办的“探寻电影之美”高峰论坛，她在论坛上分享了自身长达四十年的配音职业生涯所积累的丰富经验与深刻体会，特别强调在配音艺术中应当进一步强化戏剧的张力与演员自身的表现力，以提升作品的整体感染力。二零一九年，刘小芸参与录制了综艺节目《声临其境》，并在该节目中实现了与《新白娘子传奇》里白素贞、小青角色的原声配音团队的历史性同台演出，这次合作被视为一次难得的声音艺术重逢。长期以来，刘小芸积极倡导并推动建立两岸之间常态化的配音交流与合作机制，她大力支持举办以“两岸配音交流”为核心主题的各类活动，还曾亲自协助策划和组织台湾配音界人士前往大陆进行访问与交流的计划。在促进两岸青年文化交流方面，刘小芸也持续投入心力，她的儿子已在大陆工作生活多年，并一直从事与两岸青年交流相关的事务；刘小芸本人亦多次在公开场合鼓励台湾青年把握机遇，前往大陆寻求更广阔的发展空间。二零二四年三月，她受邀请访问重庆，在此期间参与了民间文化座谈活动，与当地文化界人士进行了深入对话。随后在二零二四年四月，刘小芸首次到访古城西安，参与了当地组织的多项文化交流活动，她对大陆城市所展现出的发展活力与文化氛围表示了高度的认可与赞赏，并持续通过个人社交媒体平台，分享她对于两岸文化现象与发展动态的观察与思考。
刘小芸的祖籍位于湖南湘乡，她虽然长期在外生活，却始终对故乡怀有深厚的情感，曾多次专程前往广西桂林探访亲友，并始终坚定地自认为是一名湖南人。在2024年的一次长途旅行中，她深入探访了重庆等中国西部城市，在此期间亲身体验了当地丰富的饮食文化，品尝了诸如重庆小面、酸辣粉以及老麻抄手等一系列颇具代表性的特色美食。除了品尝美食之外，刘小芸还有一个独特的爱好，便是收集中国大陆不同地区的特色树叶作为旅行纪念，她的收藏中包括了来自上海的枫叶、南京的梧桐叶以及北京的金黄银杏叶，每一片树叶都承载着她对当地风土人情的记忆。在个人声音的保养方面，刘小芸秉持着较为科学的原则，她主张尽量减少吸烟与饮酒，同时确保每日拥有充足的睡眠时间，她还提出一个有趣的观点，认为适当地食用辛辣食物并不会对嗓音状态产生负面影响。作为一名对表演怀有热情的人，她内心一直渴望能够尝试演绎老太太类型的声音角色，然而由于她本人的嗓音条件仍然保持着较为年轻的质感，这一愿望在目前阶段还受到一定限制。