金桢勋于1980年1月20日在韩国庆尚南道的晋州市出生。他在家中排行第三，上面有一位哥哥和一位姐姐，家庭氛围和睦。早年，金桢勋在学业上表现出色，成功考入韩国顶尖学府首尔大学的牙医预科专业，展现出在医学领域的潜力。然而，出于对表演艺术的热爱与执着追求，他在2003年做出了一个重要的人生决定，即从首尔大学退学，转而投身于演艺事业。此后，他为了系统学习表演理论与技巧，正式进入韩国中央大学的戏剧学院深造，这为他日后在影视及音乐领域的发展奠定了坚实的专业基础。
2000年，金桢勋与崔正元共同组建了名为UN（United N-Generation）的二人男子歌唱组合，由此正式开启了演艺生涯。2002年，他参与了校园题材剧集《orange》的拍摄，在该剧的前43集中担任主演，其后由郑智薰接替出演后续部分。2003年，金桢勋开始担任电台节目《U.N.金桢勋的FM人气歌谣》的主持工作。2004年，他先后参演了两部剧情影片《非武装地带》和《贱人帮》，进一步拓宽了表演领域。2005年9月，UN组合宣告解散，金桢勋自此转向个人发展道路。2006年1月，他与尹恩惠、朱智勋联袂主演了爱情剧《宫》，在剧中成功塑造了温柔深情的王子“李律”这一角色，该剧在播出期间取得了最高28.8%的收视佳绩。同年10月，他发行了首张个人迷你专辑《5 Stella Lights》，并正式以“John-Hoon”的艺名在日本出道。2007年3月，金桢勋与韩佳人、在熙等演员合作，拍摄了爱情剧《魔女幼熙》，饰演医生“柳俊河”一角；随后在10月，他推出了首张日语专辑《仆たち いつかまた・・・～ETERNITY～》。2008年2月，金桢勋首次受邀参与节目《快乐大本营》的录制，同时也在中国举办了首场粉丝见面会。同年10月，他与徐若瑄、陈紫函共同主演了中韩合拍剧《恋爱兵法》，并与徐若瑄合作演唱了该剧的片尾曲《一起走》。2009年4月28日至2011年2月28日，金桢勋依法履行兵役义务，暂停了演艺活动。退役后，他于同年6月投入爱情剧《需要浪漫》的拍摄，饰演电影导演“金泽”。2012年3月，他主演了周末剧《傻瓜妈妈》，并亲自为剧集献唱了插曲《普通人》；11月，他与左岩合作主演了微电影《西塘恋事》，此后二人再度携手拍摄了音乐录影带《如果没有你》；12月，金桢勋发行了首张国语单曲《幸福》。2013年8月，他与崔贞媛、朴允载共同主演了爱情剧《她的神话》；12月，又与姚笛、裴蓓合作，出演了以模特行业为背景的偶像剧《踮起脚尖吻到爱》。2014年1月，他在剧情片《野狗们》中挑战了流氓记者的角色；7月发行了韩语迷你专辑《5091》；同年，他还作为固定成员参与了综艺节目《我去上学啦》的录制。2015年2月，他参演了由王岳伦执导的喜剧片《爸爸的假期》，饰演一名刑警；9月，与宋智恩主演了网络剧《初恋是不变的法则》，扮演一位高中物理老师；11月，又与朴山多拉共同出演了单幕剧《Missing Korea》。2016年4月，他搭档林更新、林允儿，主演了古装剧《武神赵子龙》；5月，主演了家庭剧《重新开始吧》；12月，与贾青合作出演年代剧《卿本佳人》，饰演鲍家大院的独子“鲍文洵”。2018年9月，他参与了综艺节目《恋爱的滋味》的录制，与金钟旼、李必模、具俊烨等一同出演。根据2025年10月10日韩国媒体的采访信息显示，金桢勋预计将通过新剧《夫妻绯闻:潘多拉的秘密》重返电视荧屏。
二零零九年四月二十八日，韩国艺人金桢勋正式以现役兵身份入伍，被分配至京畿道议政府市的306补充队，由此开始了其法定的兵役义务。在随后进行的新兵基础军事训练期间，他因表现出色、各项考核成绩优异，于同年六月八日获得了韩国国防部授予的“模范士兵”荣誉称号，这一表彰是对其在训练阶段刻苦努力与杰出表现的官方认可。此后，金桢勋转入韩国国防宣传院，作为文艺兵继续履行兵役职责。直至二零一一年二月二十八日，他在完成所有规定的兵役期限后，于首尔龙山区国防部正式办理退役手续，结束了为期近两年的军旅生涯。
2006年4月24日，演员金桢勋与全秀妍共同受邀，正式担任第十届首尔国际漫画动画节（SICAF 2006）的宣传大使，为这一国际性动漫盛事推广助力。随后在2007年6月12日，金正勋又与知名演员张娜拉一同获选，被委任为当年在中国上海举办的第十三届上海国际电视节（STVF 2007）的韩流电视剧宣传大使，旨在向国际观众推广韩国电视剧文化，进一步促进韩流在全球范围的影响力拓展。
金桢勋已成功实现了个人形象的转型，彻底摆脱了过往单一的花美男标签，转而凭借日益扎实和稳定的演技实力，赢得了广大观众的关注与认可。在近年来的影视作品中，他尤其注重对角色内心世界的揣摩与呈现，通过更为细腻、缜密且自然流畅的男性心理刻画，使所饰演的人物显得饱满而真实，从而也让整部剧集的叙事层次和情感张力得到显著提升。自退伍以来，金桢勋在外形与气质上均发生了明显的变化，相比早年清新秀美的样貌，如今的他更透露出一种经过岁月沉淀的成熟男性魅力。此外，军队生活的历练也使他不仅在个人意志上得到磨练，更在人际交往与团队协作方面积累了更多经验，从而在社会互动与待人接物上显得更加从容与稳重。
根据韩国媒体于2024年1月8日发布的相关报道，一位金姓演艺人员因涉嫌在造成交通事故后拒绝配合警方进行酒精浓度检测，目前已被依法逮捕。此后，经警方进一步确认，该涉案艺人的身份正是演员金桢勋。据了解，这起事件发生于2023年12月29日凌晨，金桢勋在驾驶车辆过程中突然违规变更行车车道，导致与前方正常行驶的车辆发生碰撞事故。警方在接到报案抵达现场后，依据法定程序要求其接受酒精测试，但金桢勋先后三次拒绝了这一要求。鉴于其行为涉嫌违法，警方已正式对此案立案并展开深入调查，同时计划于下周再次传唤金桢勋到案，以进一步厘清事件细节并依法进行处理。